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蛋白浓缩神器,看这里!

发布日期:2016-01-25  浏览次数:1233  

蛋白浓缩神器,看这里!

蛋白浓缩可以说是Western Blot的常规操作,根据样品规模(体积)、通量(样品个数)、混合物的复杂程度及相关设备配套要求,就分为盐析、透析、冻干、分子筛色谱等等不同选择。

超滤,不论从操作的简便性还是处理效率来说,都算优势突出,成为蛋白浓缩/除盐/缓冲液置换等蛋白综合处理的首选。


针对蛋白超滤浓缩,默克密理博的超滤管已是各实验室必备浓缩神器了,小敏本以为大家对它已是再熟悉不过,可万万想不到上周竟然有实验小能手跟小敏抱怨超滤管放到离心机里扣不上盖子,真是惊出了小敏一身冷汗!


今天小敏不得不赶快科普下超滤管:


Amicon Ultra 超滤管分为四种型号可以处理不同体积大小的样本,每种型号又分为5种类型浓缩5种不同分子量大小的蛋白,超滤管采用垂直结构的竖膜设计避免堵膜,在短时间内即可完成浓缩、去盐和换缓冲液;其死体积设计可以防止过度离心而导致样本过干;反转离心回收设计保证了最大的回收率。


蛋白如果浓缩过快或者过度浓缩都有可能引起蛋白沉淀,Millipore建议蛋白浓缩后的最终浓度不超过20mg/ml。对于对浓缩速度敏感而容易沉淀的蛋白,建议的改进方法是:

1)离心力降为推荐离心力的30%-50%;

2)改选择截留分子量更大的过滤装置(如原本选用10k,此时可以选择30k);

3)在浓缩过程中取出超滤管,用枪头反复吹吸几次。


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