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WB的自动化时代

发布日期:2012-10-29  浏览次数:2286  

WB的自动化时代

样品制备—电泳—转膜—一抗、二抗孵育—显色,Western blot过程至少需要一天的时间。整个实验完成下来,操作人员早已精疲力尽。更者,其中一步稍有差错,都会导致实验失败。对于传统的Western blot而言,结果的重复性一直是个挑战,因为缺乏标准化的操作,且多个操作步骤引入了实验可变性。现在,解放劳动力的时代到了,让western blot自己完成这一切吧!
早在09年初,Invitrogen公司便推出了Western blotting的新工具——BenchPro 4100 Western Processing Device,它是一个台式工具,能自动处理常规的洗涤和孵育。
BenchPro 4100
该装置实现了Western blotting的自动化,简化了蛋白分析流程。这种新装置包含了两个部分:BenchPro 4100 Card Processing Station和BenchPro 4100 Western Card。Western blot的膜置于卡片中,并由卡片处理站进行自动处理。一次性的卡片杜绝了实验中的交叉污染,并节省了洗涤等手头工作,但保持了实验结果的质量。卡片处理工作站可以设定程序,实现不同的Western操作步骤,并能平行处理四个样品。但是这种设备不是全自动化,它仅能自动处理洗涤和孵育环节。
那么,想要Western blot全自动化?交给simon吧!美国ProteinSimple公司(简称PS公司)颠覆传统的Western blot,推出了simon全自动蛋白质表达分析系统,开启了“一键western”时代。
Simon全自动蛋白表达分析仪
只需要将样品、缓冲液、清洗液、一抗、二抗、化学发光底物等用移液器加到样品板中,,单击“Start”,三个小时后,就能得到结果。
  1. Simon自动执行以下六大步骤:
  2. 1.进缓冲液;
  3. 2.进样品;
  4. 3.分离:根据分子量大小进行蛋白质分离;
  5. 4.固定:UV照射样品管,激活其特有的链接物质,将分离开来的蛋白质及其异构体固定在样品管壁上;
  6. 5.免疫杂交:对分离的蛋白质进行免疫杂交。加入化学发光底物,进行化学发光检测;
  7. 6.定量:软件分析,定量分析结果。每次实验可同时分析1-12个样品,结果可在3-5小时内获得。
美国Precision Biosystems公司推出的BlotCycler同样也是一台western blot 全自动分析仪。但BlotCycler不能完成转膜这一步,仅可以全自动进行转膜后的封闭、杂交、清洗等步骤,可同时分析6-12个样品,并且第一抗体可以根据客户需要自动回收。不仅节省实验人员的宝贵时间、提高工作效率,更有效保证实验结果的重复性和灵敏度。
BlotCycler全自动蛋白杂交仪

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