关闭
扫一扫 更精彩
关闭
敏泰元生物 — 细胞与免疫学专业服务平台

Technical Information

| 技术资料
首页 // 技术资料 // Milliplex多因子检测技术应用

Milliplex多因子检测技术应用

发布日期:2013-09-07  浏览次数:2179  

Milliplex多因子检测技术应用

  • Milliplex多因子检测技术简介:
    1. Milliplex 多因子检测技术(xMAP技术)是将流式检测技术与芯片技术有机地结合在一起,以微球作为反应载体,实现了多种蛋白分子同时定量检测。
  • Milliplex多因子检测技术优势:
    1. ►涉及领域最广泛:免疫,神经,代谢,干细胞,心血管疾病,肿瘤,信号通路等。
    2. ►样本需求少:只需25-50ul的样本,可同时检测多达四十多种蛋白标志物。
    3. ►选择灵活,提供Pre-mix试剂或自由挑选因子组成一个自选试剂盒的两种选择。
    4. ►操作流程简单。
    5. ►超过1000种蛋白因子可供选择。
    6. ►All-in-one-box,试剂盒中提供了实验所需要的所有试剂。
  • 1、Milliplex多因子检测技术在干细胞研究中的应用:
    1. 诱导多能干细胞(iPSC)一直是今年来干细胞研究领域的热点。日本科学家Yamanaka (中山伸弥)在2012年因为iPSC获得了今年诺贝尔医学奖。Yamanaka教授筛选出了4个诱导多能干细胞相关基因(Oct4,Nanog, Sox2和c-Myc ),将人的表皮细胞诱导成为具有胚胎干细胞活性的细胞,并具备定向分化为心肌细胞和神经细胞的能力,因此也具备了心血管等疾病治疗的潜力。我们最新推出的试剂盒检测的指标与Yamanaka教授筛选的指标完全相同(Oct-3/4, Sox2, Nanog 和c-Myc),可用于对iPS细胞的干细胞状态进行评价。
    2. 传统干细胞标志物的检测方法包括了ICC, WB或FC. 新方法Milliplex多因子检测技术的优势不单单在于干细胞用量少,所用时间短,更重要的是该方法可以对干细胞标志物同时进行绝对定量检测,有助于对iPS细胞状态进行准确和灵敏的判断。
    图1 在诱导多能干细胞(iPSC)和对照细胞系HeLa(子宫颈癌细胞)、Ntera-2cl.D1(人胚胎睾丸癌细胞)中四个因子的表达。HFF细胞是用以制作iPSC 获得干细胞的细胞系。结果显示iPSC 中4 个干细胞相关因子的表达与对照细胞系HeLa 及 Ntera-2cl.D1 的区别。
  • 2、Milliplex多因子检测技术在细胞凋亡研究中的应用:
    1. 细胞凋亡与肿瘤,神经退行性疾病(阿尔兹海默症/帕金森病),自身免疫性疾病(类风湿关节炎,多发性硬化和I型糖尿病)以及代谢性疾病,心血管疾病等息息相关。一直是科研工作者研究的热门领域。
    2. 在目前凋亡研究中,IHC, WB, ELISA等常用检测方法都是对凋亡相关因子进行单指标检测,无法对凋亡通路进行完整的分析。而默克密理博今年新上市的Milliplex多因子检测试剂盒却为凋亡通路的整体研究提供了可能。
    图2:茴香霉素,紫杉醇或喜树碱处理白血病细胞Jurkat 和人肺癌细胞A549, 进行多重检测分析。宫颈癌细胞HeLa(λ-磷酸酶处理)作为阴性对照,从结果来看,茴香霉素能够刺激Caspase-9(内源性凋亡)和JNK 相关的Jurkat 细胞早期凋亡,而紫杉醇中Bcl-2 和Akt 的高表达显示了Jurkat 细胞对紫杉醇不敏感。喜树碱则明显能够抑制A549 细胞增殖,因此样本处理:25μM 茴香霉素处理白血病细胞Jurkat (4 小时)或5μM 紫杉醇(过夜),5μM喜树碱处理A549 细胞(过夜)。处理后用含蛋白酶抑制剂的MILLIPLEX® MAP 裂解液裂解细胞。20μg 的总蛋白用MILLIPLEX® MAP 检测“Assay Buffer2”稀释,实验过程依照产品说明书。(裂解液4o℃孵育过夜)。用Luminex® 系统检测平均荧光强度(MFI)。结果表示是三次重复实验的平均值和标准偏差。
  • 3、Milliplex多因子检测技术在肿瘤转移研究中的应用:
    1. 肿瘤转移是一个复杂的过程,往往与多种细胞因子和趋化因子相关。默克密理博新推出的人癌细胞转移试剂盒利用生物标志物(Biomarker)对多种肿瘤转移进行检测。有助于癌细胞转移的早期发现,对肿瘤治疗效果及预后进行评价。
    2. 人癌细胞转移试剂盒(Cat.# HCMBMAG-22K)可以同时对肿瘤转移相关的 9个因子同时进行绝对定量检测,最高检测灵敏度可达0.3pg/ml,大大提高了肿瘤转移检测的精确性和灵敏性。
    正常样品与肿瘤样品的对比。肿瘤样本包含了从不同治疗患者上取得的不同阶段的肿瘤。
    来源:默克密理博中国博客
    更多详情见默克密理博网站:www.millipore.com/bmia
  • 关于敏泰元生物技术有限公司
    1. 北京敏泰元科技有限公司是由一群业内资深人士创建的高技术公司,秉承“行动贵在敏捷,承诺重于泰山”的经营理念,依托中科院和北大重点实验室,凭借专业的销售市场团队和高效的后勤支持体系,致力于打造细胞和免疫学专业服务平台 。
    2. 公司主要专注于两大板块业务,一是常用的蛋白质检测平台如WB,IP,IHC/ICC,ELISA等常用试剂耗材,另一块则是细胞分选,细胞培养与检测等实验中所需要的试剂,耗材和仪器。目前公司已取得MERCK Millipore, Stemcell, Leica等品牌一级代理权,并与BD, Peprotech, CST, CORNING等建立了战略合作关系。
    3. 敏泰元作为ACD公司首家产品服务供应商,将为客户提供优质的服务和高品质的产品,帮助广大的科研工作者将此技术应用到基础研究和临床前期研究等各个领域中。
    www.mintaibio.com