1. 指的是细胞在体外条件下的生长，在培养的过程中细胞不再形成组织（动物）。培养物是单个细胞或细胞群。细胞在培养时都要生活在人工环境中，由于环境的改变，细胞的移动或受一些其他因素的影响，培养时间加长，传代导致细胞出现单一化型。

1. 细胞类型根据是否附于支持物上生长的特性，分为贴附型、悬浮型。
2. 贴附型
3. 细胞贴附在支持物表面生长，只依赖贴附才能生长的细胞叫做贴附型细胞(Anchorrage-dependent cells)这种现象与细胞分化有关。
4. 悬浮型
5. 特点： 不贴附在支持物生长，胞体圆形，在培养液中生长空间大，可长时间的生长，繁殖旺盛便于做细胞代谢研究。S180肉瘤、血液里的白细胞、K562、 HL－60。

1. 培养基
2. 培养基（Medium）是供微生物、植物和动物细胞生长和维持用的人工培植的养料，一般都含有：碳水化合物（糖）、氨基酸、无机盐（包括微量元素）、维生素和水。

1. M199 (Medium 199):
2. Medium 199 (Mod), 1X, R10-060-CV
3. 比较古老的，配方复杂的，含有核苷酸，核酸等成分的培养基。最初用于鸡胚肌细胞的培养，还用于各种细胞的维持和病毒生产。
4. RPMI1640 (Roswell Park Memorial Institute # 1640):
5. RPMI 1640， 1X w\L-glut, R10-040-CV
6. RPMI 1641， 1X w\L-glut & HEPES, R10-040-CV
7. 是McCoy’s 5A的的改进版，还有高浓度的肌醇。广泛用于悬浮细胞的培养。如人类白细胞、骨髓瘤细胞、杂交瘤细胞等血液来源的细胞。
8. Ham’s F12 (Ham’s Nutrient Mixture F12):
9. Ham’s F-12 Medium, w\L-glut, R10-080-CV
10. 含有更多的维生素，肌醇，氨基酸。用于培养大鼠，兔子和鸡胚细胞，还用于中国仓鼠卵巢细胞以及肺细胞的培养。

1. ● 干粉：3年
2. ● 液体：12—18个月
3. ● 液体基础培养基都必须在2—8℃，避光保存，不能冷冻
4. ● 干粉和液体培养基可在室温情况下运输

1. 谷氨酰胺——能量来源
2. L-GLUTAMMINE, powder, R61-030-RM
3. ►L-谷氨酰胺是一种氨基酸，细胞的重要能量来源、参与蛋白质的合成和核酸代谢。
4. ►L-谷氨酰胺不稳定，在中性的水溶液中会自发降解；降解产物对细胞有毒性（对干细胞、原代细胞影响尤其大）。
5. ►解决方案：
6. √选择不含谷氨酰胺的培养基，自己添加
7. √选择稳定的谷氨酰胺替代物

1. glutaGRO：稳定的谷氨酰胺替代物
2. glutaGRO Supplement, R25-015-CI
3. ►glutaGROTM是由丙氨酸和L-谷氨酰胺缩合形成的二肽，稳定性高
4. ►可在室温下保存，2年稳定（谷氨酰胺需冷冻保存），使用更方便
5. ►不易降解，不产生有毒氨，更利于细胞生长。
6. ►Gibco GlutaMAX的完全替代

1. 丙酮酸(Sodium Pyruvate)——能量来源
2. Sodium Pyruvate Solution 100 mM (100X), liquid, R25-000-CI
3. ►丙酮酸钠可以作为细胞培养中的替代碳源
4. ►葡萄糖不足的时候，细胞可以代谢丙酮酸钠

1. 非必须氨基酸
2. 根据细胞而定，非必须氨基酸 R25-025-CI
3. 

1. ►平衡盐溶液主要是由无机盐、葡萄糖组成；
2. ►它的作用是维持细胞渗透压平衡，保持pH稳定及提供简单的营养；
3. ►用于取材时组织块的漂洗、细胞的漂洗、配置其他试剂等
4. ● PBS磷酸盐缓冲液
5. PBS 1X w\o Ca & Mg, R21-040-CV
6. ● DPBS (Dulbecco’s Phosphate-Buffered Salines)
7. DPBS 1X w\o Ca & Mg, R21-031-CV
8. ● Earle’s 平衡盐
9. ● Hank’s 平衡盐 (HBSS)
10. HBSS, 1X, w\ Ca &Mg, R21-020-CV

1. 碳酸氢钠
2. ►多数培养基利用碳酸氢钠进行缓冲
3. ►碳酸氢钠的缓冲需要二氧化碳
4. 高碳酸氢钠（1.5-3.7g\L）需要5—10% CO2
5. 低碳酸氢钠（0.35g\L）不需要二氧化碳孵箱
6. ►干粉培养基在配置时单独添加

1. HEPES
2. HEPES Buffer 1M Soltn, R25-060-CI
3. ►氢离子缓冲剂，其作用不依赖于二氧化碳
4. ►在一定范围内对细胞无毒性作用。它是一种氢离子缓冲剂，能较长时间控制恒定的pH范围，保证细胞的良好生长
5. ►非必需，根据细胞和实验要求选择

1. 血清
2. 血液凝固后，在血浆中除去纤维蛋白分离出的淡黄色透明液体
3. ►提供基本营养物质：氨基酸、维生素、无机盐、脂类物质、核酸衍生物等，是细胞生长必须的物质
4. ►提供激素和各种生长因子：胰岛素、肾上腺皮质激素（氢化可的松、地塞米松）、类固醇激素（雌二醇、睾酮、孕酮）等。生长因子如成纤维细胞生长因子、表皮生长因子、血小板生长因子等。
5. ►提供结合蛋白：结合蛋白作用是携带重要的低分子量物质，如白蛋白携带维生素、脂肪、以及激素等，转铁蛋白携带铁。结合蛋白在细胞代谢过程中起重要作用。
6. ►促进细胞贴壁

1. 胎牛血清（FBS）
2. 康宁cellgro FBS
3. ►澳洲胎牛血清
4. Fetal Bovine Serum, Australia origin R35-076-CV
5. 澳洲——“最干净的大陆”
6. 高端产品
7. ►南美（乌拉圭）胎牛血清
8. FBS, Uruguay origin, 35-010-CV
9. 中端价格
10. 品质保证